三、杂环乙烯菌核利的类杀残留分析
乙烯菌利属于酰苯胺类衍生物中的N-取代二甲酰亚胺类。
(一)方法原理
样品用丙酮提取,菌剂二氯甲烷分配,残留中性氧化铝-弗罗里硅土柱色谱净化,分析用气相色谱电子捕获检测器(GC-ECD)测定。杂环
(二)样品制备
1、类杀提取:称取20g黄瓜捣碎样品(或过筛土样20g),菌剂加入50mL丙酮,残留振荡提取30min。分析过滤,杂环分别用30mL丙酮洗涤3次,类杀合并全部提取液,菌剂浓缩至约10mL。残留将提取液转移至分液漏斗中(内盛2%Na2SO。分析水溶液50mL),分别用30mL二氯甲烷振摇液液分配3次。合并二氯甲烷液,并经无水硫酸钠干燥,浓缩至2~3mL。
2、柱色谱净化:色谱柱中上下两端各加2cm厚无水硫酸钠,中间上部加4g弗罗里硅土(60~100目,用前经130℃活化6h),下部加4g中性氧化铝(100~200目,用前经130℃活化4~6h)。用30mL淋洗液(二氯甲烷-乙酸乙酯,10:1V/V)预淋,将样品浓缩液转移至色谱柱中,用60mL淋洗液淋洗。收集淋出液并浓缩,定容后待测。
(三)气相色谱测定
检测器为电子捕获检测器(ECD,Ni63)。色谱柱为25m长、0.25mm内径的毛细管柱。固定液为OV-1701。检测温度,色谱柱为200℃,检测器为250℃,进样口为250℃。载气为氮气(≥99.99%),流速为50mL/min;尾气流速为50mL/min;分流比为50:1。保留时间为349s。该方法的最小检出量为1.0×10-11g;最低检出浓度,黄瓜为0.005mg/kg,土壤为0.01mg/kg;黄瓜中添加0.2~5.0mg/妇时回收率为87.5%~107.6%,土壤中添加O.2~1.Omg/kg时回收率为85.1%~108.7%。
四、异菌脲的残留分析
异菌脲属于酰苯胺类衍生物中的N-取代二甲酰亚胺类。
(一)方法原理
水果样品切碎并经组织捣碎后,用丙酮振荡提取,二氯甲烷液液分配,弗罗里硅土柱色谱净化,气相色谱电子捕获检测器(GOECD)测定。
(二)样品制备
1、提取:每次取12条香蕉样品,分开果皮果肉,切碎经组织捣碎2min(为方便捣碎可加入适量蒸馏水),分别称取50g蕉肉、20g蕉皮于500mL具塞磨1:1三角瓶中,各加100 mL丙酮和2~4g助滤剂Celite 545,浸泡过夜。振荡提取30min,抽滤,残渣用50mL、40mL和30mL丙酮洗涤,抽滤,滤液浓缩去除丙酮。
2、液液分配净化:浓缩液转移到500mL分液漏斗中和5%氯化钠水溶液50mL和50mL二氯甲烷,振摇1min。静置分层后收集下层二氯甲烷,上层液体再加40mL二氯甲烷提取,合并二氯甲烷并浓缩至近干,待柱色谱。
3、柱色谱净化:色谱柱中依次从下至上加入2g无水硫酸钠、5g弗罗里硅土(用前130℃烘6 h)、0.5g粒状活性炭和2g无水硫酸钠。用40mL二氯甲烷预淋,然后将上述浓缩液用少许二氯甲烷溶解并转移到色谱柱中,再用75mL二氯甲烷-乙酸乙酯(19:1,V/V)淋洗,淋出液浓缩近干,用甲苯定容,待测。
(三)气相色谱测定
检测器为带电子捕获检测器(ECD Ni63)。色谱柱为2m长、3mm内径的玻璃柱,装填5GSE-30/Chromosorb W AW DMCS(80~100目)。检测温度,色谱柱为260℃,检测器为350℃,进样口为300℃。载气为氮气(≥99.99%),流速为30 mL/min。保留时间为80 s。该方法的最小检出量为2.O×l0-10g;最低检出浓度,香蕉肉为0.01mg/kg,香蕉皮为0.05 mg/kg;添加0.1~5.0 mg/kg时回收率,香蕉肉为88.2%~105.8%,香蕉皮为82.3%~103.7%。
五、氯苯嘧啶醇的残留分析
氯苯嘧啶醇属于麦角甾醇生物合成抑制剂类杀菌剂,属于低毒性杀菌剂,主要用于果树白粉病、梨黑腥病、锈病等的防治。以下介绍的方法适用于测定梨果类水果中氯苯嘧啶醇的残留量。
(一)方法原理
用丙酮提取氯苯嘧啶醇,二氯甲烷萃取,弗罗里硅土和活性炭混合物色谱柱净化,用气相色谱法(电子捕获检测器)检测。
(二)样品制备
1、提取:称取20g梨果类水果样品,置于250mL具塞三角瓶中,加10mL水和80mL丙酮,塞上瓶塞。静置过夜后在机械振荡器上振荡提取30min。用真空泵抽滤,在布氏漏斗中用中性滤纸过滤,滤液接入吸滤瓶中。将滤液转入500mL分液漏斗中。加入60mL二氯甲烷和50mL过饱和NaCl溶液进行液液分配,保留二氯甲烷相。将20g无水硫酸钠加到滤纸上,过滤二氯甲烷相,滤液接人250mL浓缩瓶中。用10mL石油醚冲洗分液漏斗和硫酸钠两次。用旋转蒸发器浓缩至5mL左右,温度不超过45℃。
2、柱色谱净化加4g质量分数为5%的水脱活的弗罗里硅土、0.1g活性炭和0.3g助滤剂Celite 545的混合吸附剂到玻璃色谱柱内,在混合吸附剂的底部和顶部分别添加2cm左右的无水硫酸钠。再用20mL二氯甲烷预淋柱子。将浓缩的提取物转移到色谱柱顶部,并用适量淋洗剂润洗浓缩瓶,分3~5次转移到色谱柱顶部。用45mL淋洗液二氯甲烷-乙酸乙酯(8:2,WV)淋洗,收集淋洗液,浓缩洗脱液,用5mL石油醚转溶,浓缩至近干,再用石油醚定容至5mL。
(三)气相色谱测定
采用Agilent 6890气相色谱仪(具63Ni ECD)。色谱柱为1.5m×3mm玻璃柱,固定液为4%OV-10l,担体为Chronlosorb W AW DMCS(80~100目)。柱温为260℃;进样口温度为320℃,检测器温度为320℃。载气为高纯氮气(99.999%),载气流速为50mL/min。该方法对于苹果中的氯苯嘧啶醇残留量测定的LOD为O.03ng,LOQ为0.10ng,最低检出浓度为O.003 75mg/kg。苹果中添加O.03~1.Omg/kg时回收率为86.1%~103.1%,变异系数为O.03%~3.55%。
六、多菌灵的残留分析
多菌灵属于苯并咪唑类杀菌剂,其在基质中的残留分析方法主要为高效液相色谱法。本方法主要适用于测定水果、蔬菜和土壤中多菌灵残留。
(一)方法原理
样品用甲醇振荡提取,用石油醚、二氯甲烷萃取,高效液相色谱法测定,外标法定量测定。
(二)样品制备
1、提取:准确称取粉碎混匀后的样品25.Og于100mL具塞三角烧瓶中,加入50mL甲醇和10mL O.1mol/L HCl,搅拌均匀,超声振荡提取2h。用布氏漏斗抽滤,以少量甲醇(15~20mL)清洗残渣2次,合并滤液于250mL圆底烧瓶中,在45℃水浴上浓缩,除去部分甲醇。剩20~30mL时将浓缩液转移至250mL分液漏斗中。
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相关链接:弗罗里硅土,色谱柱,氯苯嘧啶醇,活性炭
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